Подсчет тромбоцитов вручную. Ручной подсчет тромбоцитов

Существует три метода определения количества тромбоцитов:

1) Подсчет тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой. Коэффициент вариации 25-30%

2) Подсчет тромбоцитов в мазке крови (по Фонио), Коэффициент вариации 10-15%. Достоинство – возможность оценить морфологические особенности тромбоцитов.

3) Определение количества тромбоцитов на гематологическом анализаторе,

коэффициент вариации 4-10%.

Метод подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой.

Принцип. Производится подсчет тромбоцитов в камере Горяева с применением в качестве разводящей и гемолизирующей жидкости раствора оксалата аммония. При подсчете используют фазовоконтрастную микроскопию.

Реактивы: 1 % раствор оксалата аммония.

Ход определения. Исследование можно проводить как в крови, полученной из пальца, так и в стабилизированной цитратом венозной крови. В последнем случае полученный при подсчете результат умножают на коэффициент 1,1 (учитывают разведение венозной крови раствором цитрата натрия – 9:1). Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках (не в меланжере). Для этого, в предварительно высушенную чистую силиконированную или пластиковую (полистирол) пробирку пипеткой отмеривают 1,98 мл 1% оксалата аммония и осторожно вносят в нее 0,02 мл крови. В течение 1-2 мин содержимое пробирки тщательно перемешивают без вспенивания. Заполняют две камеры Горяева и на 10-15 мин помещают их для оседания тромбоцитов во влажную камеру (чашку Петри со смоченной фильтровальной бумагой или марлей). В каждой камере подсчитывают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Фазовоконтрастная микроскопия проводится при помощи обычного микроскопа, осветителя типа ОИ-19 (или аналогичного) и устройства для наблюдения методом фазового контраста КФ-1 или КФ-4 .

Метод подсчета тромбоцитов в мазках крови (по Фонио)

Принцип. Метод основан на подсчете числа тромбоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов с расчетом на 1 мкл (или 1 л) крови, исходя из содержания в этом объеме количества эритроцитов.

Реактивы: Применяют 6% раствор этилендиаминтриацетата натрия (ЭДТА).

Ход определения. Смешивают кровь с раствором ЭДТА, для этого взятый капилляром Панченкова реактив до метки «75» вносят в пробирку, затем добавляют кровь, взятую до метки «0». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе в течение 30-45 минут (обычно окраска тромбоцитов занимает в 1,5 – 2 раза больше времени, чем окраска мазка для подсчета формулы крови). Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая тромбоциты в тонких местах препарата (эритроциты должны быть расположены изолировано). Подсчет производят следующим образом: в каждом поле зрения считают количество эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов.

Расчет: Количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов составляет А0/00. Зная число эритроцитов в 1 мкл (в 1 л) крови, легко подсчитать количество тромбоцитов в 1 мкл крови (в 1 л).

Например. А=600/00 ; число эритроцитов 5 000000 в 1 мкл (5*106/мкл или 5*1012/л)

Составляют пропорцию:

Х – 5000000,откуда

Х= 60*5*1000000/1000=300*1000 мкл (300*103/мкл или 300*109/л).

Определение количества тромбоцитов с помощью гематологического анализатора

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови, или гематологических анализаторов. Эти аппараты точны, и позволяют проводить экспресс-диагностику (определения выполняются за 1 мин).

Подсчет тромбоцитов проводят согласно инструкции к аппарату. Бюджетные модели гематологических анализаторов определяют только количество тромбоцитов, а более совершенные приборы содержат полный анализ тромбоцитарного звена, и позволяют говорить о морфологии тромбоцитов. Развернутый анализ тромбоцитов на анализаторе позволяет определить такие показатели:

РLТ – количество тромбоцитов.

Норма от 180-320109/л; При выходе за эти пределы необходима микроскопия мазка.

MPV – средний объем тромбоцитов. «Молодые» тромбоциты имеют больший объем. MPV увеличивается с возрастом. Норма: 8,6-8,9 фл у детей 1 – 5 лет; 9,5-10,6 фл у людей старше 70 лет.

PDV ширина распределения тромбоцитов по объему отражает степень анизоцитоза тромбоцитов. Норма = 14-18%.

РСТ – тромбокрит доля объема цельной крови, занимаемая тромбоцитами (аналогичен Hct). Норма = 0,15-0,40%.

Также гематологический анализатор строит график распределения тромбоцитов по размеру .

Исследуемый образец. Капиллярная кровь.

Принцип метода. Тромбоциты подсчитываются в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза на 1000 эритроцитов с последующим пересчетом на 1 л крови.

Реактивы и оборудование. Микроскоп. Пробирки (1х10 см), пипетки от аппарата Панченкова, 14% раствор сульфата магния или 6% водный раствор этилен-диаминотетраацетата натрия (ЭДТА), метиловый спирт.

Выполнение метода. Капилляром Панченкова набирают раствор сульфата магния или ЭДТА до метки “75” и вносят в пробирку. Туда же вносят кровь, взятую из пальца аппаратом Панченкова до метки “0”. Содержимое тщательно перемешивают. Из смеси готовят тонкие мазки, фиксируют их метиловым спиртом 10 минут и окрашивают по Романовскому-Гимза. В каждом поле зрения микроскопа подсчитывают число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов.

Рисунок 10. Тромбоциты периферической крови в окрашенном мазке.

Оценка результатов. Зная количество эритроцитов в 1 л, рассчитывают число тромбоцитов. Пределы колебаний количества тромбоцитов, определенного этим методом, и трактовка результатов совпадают с результатами фазово-контрастного микроскопирования.

Примечания. Мазки окрашиваются 2 - 3часа, если используется сернокислая магнезия и 35 - 40 минут, если употребляется ЭДТА.

2.2.3. Подсчет тромбоцитов с использованием гематологических анализаторов.

Данный метод находит в последние годы все большее применение в клинической практике, поскольку автоматический подсчет клеток с использованием современных электронных приборов значительно облегчает и ускоряет исследование. Кроме того, помимо подсчета количества тромбоцитов (PLT), анализаторы способны определять несколько тромбоцитарных индексов:

· MPV - средний объем тромбоцитов - данный показатель увеличивается с возрастом: с 8,6 - 8,9 фл у детей 1 - 5 лет до 9,5 - 10,6 фл у людей старше 70 лет. "Молодые" кровяные пластинки имеют больший объем, поэтому при ускорении тромбоцитопоэза средний объем тромбоцитов возрастает. Увеличение показателя MPV наблюдается у больных с идиопатической тромбоцитопенической пурпурой, тиреотоксикозом, сахарным диабетом, миелопролиферативными заболеваниями, атеросклерозом; а также у курильщиков и лиц, злоупотребляющих алкоголем. Снижение наблюдается после спленэктомии, при синдроме Вискотта-Олдрича.

· PDV - распределение тромбоцитов по объему - измеряется в процентах (коэффициент вариации тромбоцитометрической кривой) и количественно отражает гетерогенность популяции этих клеток по размерам (степень анизоцитоза тромбоцитов). В норме показатель составляет 1-20%. Результаты могут быть выражены в виде кривой - тромбоцитарной гистограммы. Наличие в крови преимущественно молодых форм (макротромбоцитоз) приводит к сдвигу гистограммы вправо; старые формы с меньшими размерами находятся в гистограмме слева. (рисунок 11).

Рисунок 11. Тромбоцитарная гистограмма (а ) в норме; (б) тромбоцитопения; (в ) гипертромбоцитоз, макротромбоцитоз.

· РСТ - тромбокрит - отражает долю объема цельной крови, занимаемую тромбоцитами. Он аналогичен гематокриту и выражается в процентах. В норме тромбокрит составляет 0,15 - 0,40%.

2.3. Морфологический анализ тромбоцитов (тромбоцитарная формула).

Принцип метода. Для постановки диагноза тромбоцитопатии кроме подсчета количества тромбоцитов необходимо изучить их размеры, форму и структуру. Последняя наиболее хорошо выявляется после паноптической окраски тромбоцитов по Нохту (смесью азура и эозина).

Реактивы. Абсолютный метиловый спирт, который получают добавлением в сосуд с продажным метиловым спиртом просушенного до постоянного веса химически чистого медного купороса. Сосуд герметически закупоривается. Перед употреблением готовят смесь красок из 10 частей раствора азура, 5 частей раствора эозина и 10 частей водопроводной воды. Азур II и эозин используются в разведении 1:1000.

Ход определения. Мазки готовятся без стабилизатора (ЭДТА или сернокислой магнезии). Их фиксируют 15 минут в абсолютном метиловом спирте и красят 45 минут смесью красок.

Оценка результатов. Если в мазке некоторые тромбоциты образуют скопления по 5-6 пластинок, считается, что это хорошая агрегация.

Тромбоциты здорового человека обычно округлые ли овальные. 90 - 92% из них являются нормотромбоцитами (их диаметр в 3 - 3,5 раза меньше диаметра эритроцитов здорового человека и составляет 1,5 - 3 мкм). 8 - 12% тромбоцитов относятся к микропластинкам (диаметр 1 - 1,5 мкм), макропластинкам (диаметр 3,5 - 5 мкм) и мегатромбоцитам (6 - 10 мкм) (рис.12 ).

Структура тромбоцитов отражает степень их зрелости. Различают юные, зрелые и старые кровяные пластинки. Не всегда встречаются в крови здорового человека тромбоциты раздражения и дегенеративные пластинки.

Юные формы тромбоцитов отличаются от зрелых несколько большей величиной (2 - 5 мкм), нерезкими контурами, выраженной базофилией гиаломера и нежной необильной азурофильной зернистостью.

Зрелые формы - наиболее типичные - округлые или овальные, с ровными контурами, диаметром 2 - 4 мкм, в них четко разделяются грануломер с хорошо выраженной красно-фиолетовой зернистостью и голубовато-розовый (сиреневый) гиаломер.

Рисунок 12. Семь малых, два больших и два мегатромбоцита в мазке периферической крови.

У старых форм тромбоцитов насыщенно-фиолетовый грануломер на всю центральную часть кровяной пластинки и светло-розовый узкий гиаломер по периферии. Пластинки как бы сморщены, диаметр составляет 0,5 - 2,5 мкм.

Тромбоцитам раздражения свойственны большой полиморфизм и значительная величина. Встречаются гигантские колбасовидные, хвостатые и т.п. пластинки диаметром 7 - 9 и даже

12 мкм (рис. 13 А, Б ).

Рисунок 13. Гигантские аномальные тромбоциты в мазках периферической крови.

Дегенеративные формы не содержат зернистости (гиалиновые, голубые пластинки) или имеют темно-фиолетовую зернистость в виде комков или мелких осколков (пылинок), встречаются и вакуолизированные пластинки.

Практическое значение. Тромбоцитарная формула здоровых людей: юные 0 - 0,8%; зрелые 90 - 95%; старые 2 - 5,5%; дегенеративные - 0 - 0,2%; раздражения 0,8 - 2,5%; вакуолизированные - 0%.

Повышение числа юных форм (“омоложение” или сдвиг тромбоцитарной формулы влево) отмечается при повышении регенерации костного мозга (гемолитическом кризе, посттрансфузионных осложнениях, лейкозе, после кровопотери, спленэктомии и др.).

Большое число старых форм (“постарение” или сдвиг тромбоцитарной формулы вправо) чаще всего обнаруживается у больных раком. Формы раздражения присущи тромбоцитопеническим состояниям. Количество старых и дегенеративных форм увеличивается у больных наследственными и симптоматическими тромбастениями, циррозом печени, при отравлении бензолом.

При миелопролиферативных заболеваниях (хроническом миелолейкозе, тромбоцитемии, полицитемии и др.) в периферической крови наряду с формами раздражения встречаются “тромбобласты” - фрагменты ядер мегакариоцитов, которые окружены цитоплазмой с отшнуровывающимися пластинками.

Тромбоциты участвуют во всем процессе свертывания крови, начиная от образования первичного тромба в области повреждения кровеносных сосудов и заканчивая участием в процессах регулирования проницаемости и тонуса сосудов.

Подсчет максимально точного количества тромбоцитов осуществляется при помощи камеры Горяева и метода Фонио. Подсчет тромбоцитов по Фонио довольно точен. Метод Фонио является наиболее удобным именно при автоматическом подсчете.

Необходимые реактивы

Для определения точного количества тромбоцитов по данному методу потребуются такие реактивы как:

• раствор сульфата магния 14% (обязательно стерильный);
• краситель Романовского – Гимзы;
• фиксаторы Лейшмана либо Май-Грюнвальд.

Как готовится препарат

Кожа пальца вытирается максимально на сухо и аккуратно прокалывается.

Затем на кожу наносят маленькую капельку раствора сульфата магния и после смешивают его с выделившейся каплей крови. Из получившейся смеси готовят мазки, которые высушивают и открашивают по Паппенгейму.

Как считаются тромбоциты

В мазке, подвергнутом окрашиванию, считают 1000 эритроцитов и все попавшиеся тромбоциты. В итоге получается число, выражаемое промилле. Чтобы получить абсолютное количество тромбоцитов нужно данную величину перемножить на количество эритроцитов, имеющихся в 1 мкл, а затем разделить на 1000.

К примеру, если в мазках обнаружено 64 промилле тромбоцитов, эритроциты считаются 5 x 10 в 1 мкл, а тромбоциты 64 x 3,5 x 10 разделить на 1000 равно 224 x 10 в 3 степени в 1 мкл.

Тромбоцитами по Фонио называется исследование, которое позволяет выявить истинную концентрацию тромбоцитов в крови и определить первопричины многих патологий. Эти клетки крови оказывают большое влияние на способность крови свёртываться.

В данной статье мы расскажем о сути анализа тромбоцитов по методу Фонио и правильную интерпретацию его результатов.

Суть данного анализа

Далеко не каждый пациент знает, что представляет собой подсчёт количества тромбоцитов по Фонио. Он осуществляется на 1000 эритроцитов в материале, смешанном со специальным реактивом-красителем. После этого полученное число пересчитывается в отношении на 1 мкл или 1 литр крови.

Достоинством этого метода является достаточно точное определение количества этих кровяных клеток, что, естественно, ведет к более точной постановке диагноза.

Разберемся, как именно осуществляют подсчет тромбоцитов по Фонио.

Как проводят анализ?

Общее количество тромбоцитов в определенном представляет собой коагулограмму. Для проведения данного анализа забирают капиллярную кровь из пальца. Сдавать этот анализ необходимо каждому обследуемому пациенту, так как его результаты могут помочь лечащему врачу установить наличие или отсутствие многих опасных заболеваний.

Во время сдачи анализа на уровень тромбоцитов в крови следует учитывать следующее:

• Концентрация этих кровяных телец оказывается максимальной после приёма пищи и физических нагрузок. По этой причине сдавать материал необходимо по истечении не менее восьми часов после последней трапезы.
• Данное требование относится и к физическим нагрузкам: если пациент сдаст кровь в состоянии возбуждения или после тяжелых физических нагрузок, то результат может оказаться ложным.
• Кровь необходимо сдавать рано утром.
• Для достижения максимальной точности анализ необходимо провести еще дважды с промежутком в 3-5 дней.

Подсчет результатов

Для подсчета количества тромбоцитов по Фонио используют 2,6%-й раствор этилендиаминтетраацетата натрия (ЭДТА) и 14%-й раствор сульфата магния. Реактивы набирают с помощью пипетки к СОЭ-метру (или капилляра Панченкова).

1. Сначала в пробирку вводят один из реактивов, который в капилляре должен находиться на уровне деления 75. Туда же добавляют кровь, взятую пипеткой (до уровня деления К).
2. Компоненты тщательно перемешиваются, а затем подготавливаются тонкие мазки.
3. После этого мазки окрашивают по методике Романовского-Гимзе в течение 35-45 минут, если был использован ЭДТА, или на протяжении двух-трёх часов, если применялся магния сульфат. В течение этого временного промежутка тромбоциты окрашиваются в фиолетово-розовый цвет.

Как проводится подсчёт тромбоцитов по методу Фонио? Для этого в микроскопа проводят подсчет тромбоцитов и эритроцитов до 1000 красных кровяных клеток. Число тромбоцитов в плазме крове узнают, умножая их количество в мазке на число эритроцитов в 1 мкл, а затем полученное значение делят на 1000. Специфический цвет помогает врачу более точно подсчитать количество исследуемых клеток.

Исследование обладает высокой точностью, поэтому большое количество врачей используют результаты, полученные данным способом.

Норма тромбоцитов по Фонио интересует многих.

Особенности метода

Данная методика на сегодняшний день является самой популярной и распространенной. Основное отличие этой методики заключается в том, что форменные элементы подсчитываются в окрашенном мазке крови.

Данный метод обладает следующими достоинствами по сравнению с другими:

• лаборант может очень хорошо рассмотреть все клетки крови под микроскопом;
• кровь можно исследовать в любое удобное время, не привязываясь к моменту получения материала;
• клетки подсчитываются по достаточно простой формуле, помимо этого, число зависит от 1000 эритроцитов в микролитре крови.

Что выявляет анализ тромбоцитов по Фонио?

О чём свидетельствуют пониженные показатели?

Если уровень тромбоцитов у обследуемого пациента понижен, то это свидетельствует о наличии тромбоцитопении, которая развивается от:

• воздействия ионизирующего излучения (радиации);
• отравления свинцом и прочими веществами;
• различных заболеваний системы крови;
• от наличия у пациента коллагенозов;
• развивающегося нефрита хронической формы.

У людей с пониженным уровнем тромбоцитов достаточно часто возникают гематомы, кровоподтеки и внутренние кровотечения, что является признаком пониженной эластичности и сопротивляемости сосудов. Также часто можно наблюдать петехии - точечные красные или фиолетовые пятна на коже.

Подсчет тромбоцитов по методу Фонио может выявить повышение их числа.

О чем говорит повышенный уровень тромбоцитов?

Тромбофилия - высокий уровень тромбоцитов в крови, наблюдается в следующих состояниях:

• приём некоторых лекарственных препаратов;
• после проведения оперативного вмешательства;
• после удаления у пациента селезёнки;
• вследствие травм, сопровождавшихся большой потерей крови;
• при развитии у человека железодефицитной анемии;
• при наличии у пациента развивающихся злокачественных новообразований.

Очень опасна для жизни и здоровья пациента, поскольку в таком случае значительно возрастает риск возникновения тромбоза - образования внутри сосуда сгустка крови, препятствующего нормальному кровотоку.

Повышенное количество тромбоцитов может оказаться весьма опасным для беременных женщин. Такое явление может привести к следующим крайне неприятным последствиям:

• выраженная форма токсикоза у беременных;
• самопроизвольное прерывание беременности;
• варикоз во время беременности;
• развитие тромбоза ног при беременности;
• увеличение размеров кровяного сгустка, образовавшегося внутри сосуда;
• инфаркт.

Также при наличии воспаления легких, печени, оболочек мозга, токсоплазмоза, уровень тромбоцитов в крови может повыситься. В таком состоянии повышается и уровень лейкоцитов.

Нормальные показатели у детей и взрослых

Нормальный показатель тромбоцитов по Фонио колеблется в пределах от 120 до 400 тыс. в 1 куб. миллиметре крови. Но стоит не забывать, что для определенных групп населения полученные показатели будут значительно различаться. Такие различия считаются вариациями нормы.

Норма для детей старше 1 года составляет 180-320 тыс. в 1 куб. миллиметре крови. Для новорожденных детей предел показателя тромбоцитов несколько шире - от 100 до 420 тыс. в 1 куб. миллиметре.

Для мужчин нормальный показатель тромбоцитов колеблется в пределах от 180 до 400 тыс. Максимальная концентрация этих кровяных клеток наблюдается в возрасте 40 лет. В последующем количество тромбоцитов несколько понижается, но не опускается ниже 320 тыс.

Нормальный показатель рассматриваемых элементов крови для женщин колеблется в пределах 180-340 тыс. Максимальная концентрация наблюдается в возрасте 16 лет. При менструации норма снижается до 150 тыс. В подростковом возрасте это число может упасть даже до 75 тыс.

Анализ крови на тромбоциты по Фонио очень информативен.

Что влияет на концентрацию?

Многие факторы причастны к повышению уровня тромбоцитов. Так, все инфекционные заболевания организма в острой форме приводят к увеличению количества данных кровяных клеток в крови. То же самое наблюдается и при наличии нарушений кроветворной системы и онкологических заболеваний.

Также количество тромбоцитов в крови часто меняется у людей, переживающих постоянные стрессовые ситуации. Помимо этого, некоторым покажется странным, что во время больших кровопотерь количество этих кровных клеток возрастает, но это говорит о том, что организм человека таким образом компенсирует потери крови.

Повышенная концентрация тромбоцитов также наблюдается у людей, долгое время употребляющих спиртные напитки.

При длительном и бесконтрольном приёме препаратов, оказывающих тромоцитопеническое действие, картина крови значительно изменится. Такое же происходит и при заболевании некоторых органов, к примеру, печени, щитовидной железы и др. Иногда порезы или кровотечения из носа могут негативно повлиять на количество тромбоцитов в крови, понижая их количество.

Что нужно делать для нормализации показателя тромбоцитов?

Понятное дело, что меры по нормализации концентрации тромбоцитов будут несколько отличны для разных вариантов полученных результатов. Но все они окажутся бесполезными, если вредные факторы продолжают воздействовать на организм. В первую очередь необходимо избегать физических и эмоциональных перегрузок.

Итак, увеличить уровень тромбоцитов можно следующими способами:

1. Исключить из рациона питания спиртные напитки, морскую капусту, соления и красный виноград.
2. Включить в свой рацион свежую рыбу, болгарский перец, печень, гречку и яблоки.
3. Иногда лечащий врач может назначить специальные лекарственные препараты для подъёма уровня тромбоцитов. Категорически не стоит заниматься самолечением!
4. Не принимать лекарства, которые в качестве побочного эффекта могут вызвать тромбоцитопению.
5. Употреблять витамины группы А, В и С.

Для понижения количества тромбоцитов необходимо в первую очередь наладить здоровый образ жизни и исключить стрессовые ситуации. Категорически запрещается заниматься травмоопасными видами спорта. Понизить уровень тромбоцитов поможет:

• употребление препаратов ацетилсалициловой кислоты;
• отказ от бананов, граната, манго, плодов шиповника;
• включение в рацион свеклы, черники, клюквы, облепихи;
• употребление поливитаминов и препаратов магния.

Выводы

Таким образом, исследование обладает высокой точностью. И если в результате оно показало отклонения от нормы, то в срочном порядке необходимо скорректировать этот показатель, дабы избежать опасных последствий.

Теперь понятно, что значит тромбоциты по Фонио.

Норма у здорового человека:

Исследование по методике Фонио применяется наиболее часто. Оно базируется на определении количества пластинок в окрашенных мазках крови с использованием химреактивов:

• сульфат магния 14%;
• этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) натрия 6%.

Подсчет тромбоцитов в мазке крови

Ход исследования

Сульфат магния или ЭДТА при помощи капилляра Панченкова помещают в стеклянную пробирку, туда же помещают капиллярную кровь, которую берут, используя тот же капилляр.

Кровь с реактивом перемешивают, а затем из полученного раствора готовят материал для определения.

Для этого на предметное стекло наносятся тонкие мазки, они фиксируются и окрашиваются:

• с применением магния сульфата – 2-3 часа;
• с использованием ЭДТА – 30-45 минут.

После высыхания мазки разглядывают под микроскопом, у которого имеется иммерсионный объектив для увеличения изображения и усиления яркости.

Кровяные пластинки должны располагаться по отдельности, чтобы этого добиться используется самое тонкое место мазка.

Как считать тромбоциты в мазке крови?

Для подсчета мазок передвигается под объективом микроскопа, чтобы были подсчитаны 1000 эритроцитов. Затем считают находящиеся среди них кровяные пластинки.

При известном количестве эритроцитов в одном литре крови, можно произвести подсчет абсолютного числа тромбоцитов.

Определение количества при помощи камеры Горяева

По методу Горяева тромбоцитарные пластинки считает камера с применением цитратного вещества. Число клеток определяют в 1 МК/л или в литре крови.

Для этого используют следующие химреактивы:

Химреактив №1:

• гидрохлорид кокаина 3 г;
• хлорид натрия 0,25 г;
• фурацилин 0,25 г;
• вода 100 мл.

Химреактив №2:

• 1% раствор оксалата аммония. Раствор надо прокипятить, профильтровать и после этого он хранится на холоде. При помощи этого реактива растворение эритроцитов происходит быстрее.

Ход исследования

Используют материал, взятый из вены в пробирку с цитратом. Этим веществом служит ЭДТА. При взятии из пальца тромбоциты могут давать сгустки.

Нужно взять 4 мл химреактива №1 или №2, добавить 0,02 мл крови, получится разведение в 200 раз. Кровь с реактивом слегка взбалтывают, оставляют на полчаса, за это время происходит лизис.

В подготовленную камеру помещают материал из подготовленной крови, а затем опускают во влажную чашку Петри на 5 минут для оседания тромбоцитарных клеток.

В камере клетки хорошо видны, благодаря тому, что используется фазово-контрастные линзы объектива.

Частицы пыли и грязи должны быть хорошо вымыты, чтобы не оставлять след на стеклянной таре и самой камере, иначе их при подсчете можно принять за тромбоциты.

Подсчитывание с помощью счетчиков

Счетчик называется автоматический гематологический аппарат. С его помощью можно определить количество кровяных пластинок, также сделать гистограмму (распространение по величине).

Аппаратное исследование достаточно точное, делается экспресс-методом, который выдает результаты в течение 1 минуты.